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層流手術室日常監(jiān)測，空氣采樣方法說明
層流手術室空氣日常監(jiān)測方法說明:
要求日常實行動態(tài)監(jiān)測，必測項目為平板采樣法（沉降法）或采樣器法(浮游菌法)檢測細菌菌落總數。
（1）回風口動態(tài)平板采樣法：應在手術開始、手術2小時、手術結束前抽檢3-4次。每個回風口中部擺放3個傾斜30℃，Φ90 培養(yǎng)皿，暴露30分鐘后，37°C培養(yǎng)24小時。
標準：每皿菌落計數平均值應符合表4標準要求。單皿最大值不應超過平均值3倍。
（2）動態(tài)采樣器法：浮游菌菌落檢測應在手術進行如切皮、縫合、連臺手術之間、手術進行4小時等，選擇不少于3個程序，測定細菌菌落總數。
標準：I級<30cfu/m3 ；II級<150 cfu/m3；III級<450 cfu/m3；IV級<500 cfu/m3。
（3）其他潔凈用房在當天上午10時和下午4時各測1次，在每個回風口中部擺放3個Φ90培養(yǎng)皿，沉降0.5h后在37℃下培養(yǎng)24h。
標準：同回風口動態(tài)平板采樣法標準。
層流手術室靜態(tài)（空態(tài)）時空氣采樣方法：
1、采樣方法：
（1）當送風口集中布置時，應對手術區(qū)和周邊區(qū)分別檢測；當送風口分散布置時，按全室統(tǒng)一布點方法檢測。
（2）沉降法采樣時，用直徑9cm的培養(yǎng)皿，在空氣中暴露30min，37℃培養(yǎng)24h，培養(yǎng)皿中的菌落數（cfu）代表空氣中沉降下來的細菌數，以個/皿表示。
（3）浮游法采樣時，用裂隙采樣器在空氣中隨機采樣30min，對采樣皿或采樣條培養(yǎng)得出的菌落數（cfu），代表空氣中浮游下來的細菌數，以個/m3表示。
2、采樣高度：
（1）采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；
（2）在手術區(qū)檢測時應無手術臺；當手術臺已固定時，檢測高度應在臺面之上0.25cm。
3、布點方法：（見表1）
4、采樣注意事項：
（1）在100級區(qū)域檢測時，采樣口應對著氣流方向；在其他區(qū)域檢測時，采樣口均向上；
（2）采樣后的培養(yǎng)基條或培養(yǎng)皿，應37℃條件下培養(yǎng)24h，并計算菌落數，菌落數的平均值均四舍五入選位到小數點后1位；
（3）當采用浮游法測定浮游菌濃度時，細菌濃度測點數應和被測區(qū)域的含塵濃度測點數相同，且宜在同一位置上。每次采樣應滿足表8的最小采樣量的要求，每次采樣時間不應小于30分鐘。
（4）當用沉降法測定沉降菌濃度時，細菌濃度測點數即要不少于含塵濃度測點數，應滿足表9規(guī)定的最少培養(yǎng)皿數的要求（不含對照皿）。如沉降時間適當延長，則最少要求培養(yǎng)皿數可按比例減少，但不能少于含塵濃度的最少測點數。
（5）不論用何種方法檢測細菌濃度，都必須有兩次空白對照。第一次用于檢測培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條（每批一個對照皿（條））；第2次對操作過程做對照試驗（每室或每區(qū)將1個對照皿（條），打開后又立即封蓋，進行模擬操作）；兩次對照結果必須為陰性，整個操作過程應符合無菌操作的要求。
（6）新房驗收時，應最后做空氣、物表細菌檢測。
表1 潔凈手術室空氣采關布點位置與方法
區(qū)域 最少測點數 手術區(qū)圖示
Ⅰ級 潔凈手術室 5點（雙對角線布點）
手術區(qū)和潔 凈輔助用房 8點（每邊內2點）
局部100級區(qū)
Ⅰ級 周邊區(qū)
Ⅱ～Ⅲ級 潔凈手術 3點（單對角線布點） 集中送風面正投影區(qū)
室手術區(qū) 6點（長邊內2點，短邊內1點） 集中送風面正投影區(qū)
Ⅱ級 周邊區(qū) 4點（每邊內1點）
Ⅲ級 周邊區(qū)
Ⅳ級潔凈手術室及分散 4點（避開送風口正下方）
布置送風口的潔凈室面 2點（避開送風口正下方）
積＞30㎡
面積≤30㎡
注：分布在集中送風面正投影區(qū)角的采樣點距離鄰近兩邊的距離位0.12米
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